噬菌体Bp7尾丝蛋白gp37的原核表达与鉴定

作者: 孙虎芝 ; 任慧英 ; 张灿

关键词: 噬菌体Bp7 尾丝蛋白gp37 绿色荧光蛋白EGFP 大肠埃希菌K12

摘要：为了研究噬菌体尾丝蛋白gp37在识别宿主菌大肠埃希菌K12过程中的作用，PCR扩增获得gp37基因C端1161bp序列，以EGFP为荧光标签，构建重组表达质粒pET-28a—EGFP—gp37，在大肠埃希菌BL21（DE3）中IPTG诱导表达重组蛋白EGFP—gp37，亲和层析纯化蛋白。SDS—PAGE及Westernblot检测结果表明，重组蛋白EGFP—gp37在大肠埃希菌BL21（DE3）为可溶性表达，表达量占菌体总蛋白量的23％。EGFP-gp37融合蛋白与大肠埃希菌K12相互作用，激光共聚焦显微镜检测结果显示，尾丝蛋白gp37能够吸附到宿主菌K12表面，表明尾丝蛋白gp37参与宿主菌受体的识别和吸附过程。