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猪瘟病毒EO蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
作者: 贾俊杰 ; 张必凯 ; 张莉 ; 谢金鑫 ; 郭焕成 ; 龚文杰 ; 涂长春
关键词: 猪瘟病毒 E0蛋白 原核表达 多克隆抗体
摘要：为表达猪瘟病毒E0蛋白并制备其多克隆抗体，本研究构建E0蛋白的原核表达载体，转化至BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达，亲和层析及切胶回收纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Westernblot分析显示E0重组蛋白主要以包涵体形式表达，亲和层析纯化获得了E0重组蛋白，用其免疫Balb／c小鼠4次制备E0重组蛋白的多克隆抗体。间接ELISA显示，免疫小鼠血清中EO蛋白抗体效价为1：50000。获得的E0蛋白多抗能与病毒感染细胞及E0-EGFP融合表达细胞中天然结构的E0蛋白发生特异性反应。本研究制备的E0重组蛋白及其多克隆抗体为进一步研究E0蛋白的功能和免疫原性奠定了基础。