犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

作者: 毛倩倩 ; 卜宾 ; 唐青海 ; 阚云超 ; 姚伦广 ; 唐存多 ; 焦铸锦 ; 杨建伟

关键词: 犬细小病毒NY株 VP2 原核表达鉴定

摘要：犬细小病毒（CPV）编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株（NY株,基因型为2a型）重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转化E.coli BL21（DE3）表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白（rVP2）的分子质量约为72ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为0.2mmoL/L IPTG诱导4h表达量达到最高。rVP2不仅与His标签mAb反应,也能与CPV特异性阳性血清反应,说明rVP2具有良好的反应原性,为CPV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的研究奠定了基础。

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犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

作者: 毛倩倩 ; 卜宾 ; 唐青海 ; 阚云超 ; 姚伦广 ; 唐存多 ; 焦铸锦 ; 杨建伟

关键词: 犬细小病毒NY株 VP2 原核表达 鉴定

关键词: 犬细小病毒NY株 VP2 原核表达鉴定