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非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定
作者: 梁云浩 [1,2] ; 曹琛福 [1] ; 叶奕优 [1] ; 花群义 [1] ; 张彩虹 [1] ; 曾少灵 [1] ; 陶虹 [1] ; 廖立珊 [1] ; 刘建利 [1] ; 唐勇 [2] ; 吕建强 [1]
关键词: 非洲猪瘟病毒 p72蛋白 脂质体介导 重组杆状病毒
摘要：将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。