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旋毛虫新生幼虫期特异性基因T668主要抗原表位短肽的筛选
作者: 苗雅娟 ; 冯爽 ; 王学林 ; 冯小静 ; 于申业 ; 唐斌 ; 吴秀萍 ; 刘明远
关键词: 旋毛虫 抗原表位 反应原性 特异性
摘要:为进一步从T668基因编码的蛋白中寻找到敏感性及特异性较高的抗原表位,对T668主要抗原表位区进行抗原表位作图,进一步设计了一套共16条覆盖整个抗原表位决定区的短肽,并与GST融合表达,用Westernblot筛选具有高反应原性的短肽。结果显示,N5EM4、N5EM5、N5EM7、N5EM8、N5EM9、NSEM11 6条融合短肽与感染旋毛虫的猪血清有强阳性反应条带,但均表现出较明显的假阳性。将筛选出的6条短肽人工合成后与牛血清白蛋白偶联,利用Dotblot进一步验证,结果显示融合短肽N5EM11—BSA表现出良好的反应原性和特异性。此抗原短肽的发现对进一步确定T668蛋白虫体定位、功能及旋毛虫病诊断试剂盒的研发奠定了基础。
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