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纹皮蝇HypoderminC基因真核表达质粒构建及小鼠免疫试验
作者: 白红岩 [1] ; 刘春霞 [2] ; 呼和巴特尔 [1] ; 王文龙 [2]
关键词: 纹皮蝇 Hypodermin C基因 真核表达质粒 免疫 小鼠
摘要:根据GenBank发表的HypoderminC(HC)基因序列设计引物,以原核表达载体pET-HC为模板,PCR扩增HC基因,将克隆基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-HC。将重组质粒pVAX卜HC转染小鼠胎儿成纤维细胞,以间接免疫荧光法检测HC基因在细胞中表达。用真核表达质粒pVAX1-HC经双侧胫前肌注射昆明小鼠,对小鼠进行体液免疫和细胞免疫研究。结果表明,小鼠血清抗体水平和淋巴细胞增殖水平明显高于非免疫对照组。本研究成功构建了真核表达质粒pVAX1-HC,为纹皮蝇核酸疫苗研发奠定了基础。
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