- · 【植保学院】多措并举保障留校学生过温馨年[02/18]
- · 【资环学院】举办留校学子新春趣味运动会[02/16]
- · 【信息学院】制作专属微信红包封面[02/13]
- · 【创新学院】新春送祝福温暖学子心[02/12]
- · 【资环学院】新春慰问暖人心 浓浓关爱显真情[02/12]
- · 【学生处】因为有你们才“最美”[02/10]
- · 【园林学院】《中国新疆之历史印记》纪录片引发师生关注[02/08]
- · 【农学院】整合资源引企入教 扎实推进人才培养[02/08]
禽呼肠病毒σC基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立
作者: 董嘉文 ; 孙敏华 ; 李林林 ; 胡奇林
关键词: 禽呼肠病毒 σC基因 克隆与表达 酶联免疫吸附试验
摘要：将RT-PCR扩增得到的禽呼肠病毒（ARV）S1133毒株的σC基因克隆至pMD-18T-Simple载体，经酶切及测序鉴定，证明该基因片段为ARVdC基因。将该基因亚克隆至pET32a（＋）成功构建了表达载体pET32a-σC。该重组质粒在大肠埃希菌BL21中经1．0mmol／LIPTG诱导5h得到最佳表达。pET32a-σC蛋白的分子质量为55ku，Westernblot分析表明，该重组蛋白能与ARV阳性血清发生特异性反应，表明其具有良好的反应原性。将纯化好的ARVσC蛋白作为包被抗原，确定了该方法的抗原最适包被浓度为2μg／mL，血清的最适稀释度为1：400。用建立的ELISA方法检测接种过ARV疫苗的65份临床血清样品，测得44份为阳性，阳性率为67．7％；未接种ARV疫苗的30份血清样品检测结果均为阴性。