猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的亚克隆及原核表达

作者: 李建辉 ; 左玉柱 ; 孙彦欣 ; 范京惠

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因原核表达

摘要：本研究从河北省保定地区6份疑似感染猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）病猪的肺脏中,通过RT-PCR获得PRRSV GP5蛋白完整的基因片段,克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,再设计一对引物从重组载体pMD18-T-GP5中扩增出缺失了N端30个氨基酸残基的dGP5的编码序列dORF5,克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,构建原核重组质粒（pGEX-6p-dGP5）,转化至E.coli BL21感受态细胞。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳可检测到分子质量为40ku的目的蛋白。经Western blot分析表明,该蛋白与PRRS阳性血清具有良好的免疫反应性,为进一步研究PRRS新型基因工程疫苗和诊断试剂奠定了基础。

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的亚克隆及原核表达

作者: 李建辉 ; 左玉柱 ; 孙彦欣 ; 范京惠

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 原核表达

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因原核表达