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1型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立
作者: 杨依霏 [1] ; 罗青平 [2] ; 张蓉蓉 [2] ; 艾地云 [2] ; 廖永洪 [2] ; 邵华斌 [2] ; 程国富 [1]
关键词: 鸭疫里氏杆菌 重组ompA蛋白 ELISA
摘要:以1型鸭疫里氏杆菌(RA)全基因组保守区域ompA基因的重组表达产物为包被抗原,建立了检测RA血清抗体的间接ELISA方法。原核表达的重组ompA蛋白经纯化后作为包被物,以方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度为1.5μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100。与普通的微量凝集试验相比较,该方法灵敏度高于凝集试验约16倍~128倍。与鸭源大肠埃希菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭链球菌、鸭源呼肠病毒、鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒感染鸭血清均无交叉反应,表明该方法特异性好。利用该方法检测了雏鸭免疫RA灭活油乳剂疫苗之后血清抗体水平。
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