山羊痘和小反刍兽疫病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者: 赵文华 ; 杨仕标 ; 高华峰

关键词: 山羊痘病毒小反刍兽疫病毒实时荧光定量RT-PCR 探针

摘要：为实现对山羊痘病毒（GTPV）和小反刍兽疫病毒（PPRV）的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及PPRV的M基因,分别设计合成两套特异性引物及探针；探针分别用5＇-FAM-TAMRA-3’及5＇-JOE-Eclipse-3＇标记物进行标记以实现同步检测.结果显示,所建立的ITR-M二联探针荧光定量RT-PCR方法可同时特异性检测GTPV和PPRV产生特异性荧光信号,而对禽痘病毒、犬瘟热病毒等相关病毒无荧光信号可检出.以GTPV-ITR和PPRV-M的pMD-18T载体质粒为标准品,构建了双重标准曲线,ITR M探针的检测敏感度可分别达103拷贝/μL及101.2拷贝/μL cDNA.本研究初步建立了可同步快速检测GT-PV和PPRV的二联实时荧光定量RT-PCR法.

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山羊痘和小反刍兽疫病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者: 赵文华 ; 杨仕标 ; 高华峰

关键词: 山羊痘病毒 小反刍兽疫病毒 实时荧光定量RT-PCR 探针

关键词: 山羊痘病毒小反刍兽疫病毒实时荧光定量RT-PCR 探针