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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

小鼠SIGIRR基因重组腺病毒的构建及鉴定

作者: 梁晓华 ; 王艳 ; 田丰 ; 黄勋 ; 高坤祥 ; 李小飞 ; 姜涛

关键词: 单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR) 急性肺损伤 腺病毒载体 AdEasyTM Toll样受体(TLR)

摘要:拟构建小鼠SIGIRR基因重组腺病毒并进行鉴定,为SIGIRR在小鼠急性肺损伤预防及治疗方面的研究提供基础.利用AdEasyTM系统构建SIGIRR基因重组腺病毒,并检测SIGIRR mRNA及蛋白在感染细胞及组织中的表达.通过多次扩增后,大量制备高滴度腺病毒.结果表明,本试验成功构建了携带小鼠源性SIGIRR基因的重组腺病毒表达载体Ad-mSIGIRR,病毒感染滴度为5×10^10 pfu/mL,滴度符合下一步试验要求.Western blot和免疫组化方法分别检测到mSIGIRR在体内的高效表达,且经气管滴注感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化.明确了SIGIRR基因的重组腺病毒可以在小鼠活体内使mSIGIRR过表达,且经气管滴注5×109pfu的病毒感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化.


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