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新型基因芯片检测禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鸡减蛋综合征病毒
作者: 廖秀云 [1] ; 陶虹 [2] ; 邵建宏 [1] ; 罗宝正 [1] ; 薄清如 [1] ; 刘国昌 [3] ; 徐海聂 [1] ; 沙才华 [1]
关键词: 基因芯片 禽流感病毒 新城疫病毒 鸡减蛋综合征病毒
摘要:建立了可同时筛选禽流感病毒(AIV)通用型、H4、H5、H6、H7、H9、N1、N2、N9亚型及鸡新城疫病毒(NDV)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的基因芯片检测方法.从GenBank中下载相关序列,利用分子生物学软件设计特异性引物和杂交探针.使用Dr.chip系统进行芯片点样、杂交、显色、读数,优化反应条件后做灵敏度、特异性试验,然后应用于临床检验.结果显示,各病原间无交叉反应,探针可特异性识别靶基因;病原的最低浓度为4.83 pg/μL,灵敏度较高;每个梯度的两个反应结果一致,重复性良好.对临床样品检验,结果同病毒分离鉴定方法一致.本研究建立的基因芯片检测方法可用于禽流感通用型、H4、H5、H6、H7、H9、N1、N2、N9亚型及NDV、EDSV的鉴别检测.
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