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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

牛病毒性腹泻病毒1型和2型双重RT-PCR检测方法的建立

作者: 王克栋 [1,2] ; 熊浩 [1,2] ; 季新成 [2] ; 冉多良 [1] ; 彭武丽 [2] ; 于学辉 [2] ; 史茜 [2]

关键词: 牛病毒性腹泻病毒 GAPDH基因 基因分型 内标 双重RT-PCR

摘要:根据GenBank已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因1型和2型毒株的5 '端非编码区(5'-UTR)保守序列的差异,设计2对特异性引物,并以牛GAPDH基因为内标,设计1对特异性引物,建立牛病毒性腹泻病毒分型与内标三重RT-PCR检测方法.3对引物可分别扩增出的片段大小为127、94、152 bp,与预期大小相符.经反应条件优化,该方法的灵敏度为100 TCID50,与不加内标检测灵敏度相当.经临床样品检测验证,该方法具有较好的特异性和重复性,可用来对牛病毒性腹泻病毒分型进行快速准确的检测.


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