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牛病毒性腹泻病毒双单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用
作者: 杨俊兴 [1,2] ; 曹琛福 [1] ; 曾少灵 [1] ; 卢体康 [1] ; 孙洁 [1,2] ; 张彩虹 [1,2] ; 唐金明 [1,2] ; 陶虹 [1,2] ; 吕建强 [1] ; 花群义 [1,2]
关键词: 牛病毒性腹泻病毒 酶联免疫吸附试验 单克隆抗体
摘要：为了建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）抗原快速检测ELISA方法，用于BVDV抗原的快速检测。用纯化的BVDV作为抗原，经动物免疫、细胞融合、间接ELISA筛选和亚克隆，得到了3株抗BVDV的单克隆抗体（2A6、2F4和5C9）。选用单克隆抗体2A6和5C9包被ELISA板，用HRP标记的单克隆抗体2F4作为夹心抗体，建立了检测BVDV的双单克隆抗体夹心ELISA方法。通过对BVDV阳性样品、其他病毒阳性样品和阴性对照样品及系列稀释的阳性样品检测，表明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。用ELISA检测326份临床样品，结果表明该方法与RT-PCR和商品化ELISA试剂盒检测结果符合率分别为98．8％和99．0％。该方法可以用于BVDV抗原快速检测和对大量样本的筛选。