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犬细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立
作者: 祝文琪 ; 徐卫康 ; 陆彦 ; 吴国娟
关键词: 犬细小病毒 荧光定量PCR 建立
摘要：建立一种敏感性高、重复性好、特异性强的犬细小病毒荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中犬细小病毒（CPV）VP2蛋白基因序列，选择其保守序列设计引物并构建质粒，对系列稀释的质粒进行扩增构建标准曲线，其相关系数为0．997，所建立的方法最低可检测10拷贝／μL，且对猪细小病毒、猪圆环病毒没有阳性检出，进行5次重复检测，体系的变异系数（CV）〈2％，另对12份犬细小病毒阳性血液样品进行检测，均得到209kb大小的片段。表明所建立的SYBR—Green荧光定量PCR方法具有良好特异性、敏感性和重复性，可用于犬细小病病毒的病原检测。
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