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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

禽呼肠病毒S1733株σNS单克隆抗体的制备及其特性鉴定

作者: 谢志勤 ; 谢芝勋 ; 刘加波 ; 庞耀珊 ; 邓显文 ; 谢丽基 ; 范晴 ; 罗思思

关键词: 禽呼肠病毒 σNS蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定

摘要:用体外表达的禽呼肠病毒(ARV)dNs蛋白作为筛选抗原,筛选出σNS蛋白的特异单克隆抗体,并对制备的抗体特性进行鉴定。将纯化浓缩的禽呼肠病毒S1733毒株100μg免疫Balb/c小鼠,取四免后3d的鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA测定融合细胞分泌的抗体效价,阳性孔细胞经3次有限稀释法进行克隆,通过Westernblot、Dot—ELISA、直接免疫荧光试验、病毒中和试验等方法对获得的单抗特性进行检测。经σNS蛋白筛选和克隆成功获得1株杂交瘤细胞株SB2—1K3,该单克隆杂交瘤细胞株能稳定分泌抗禽呼肠病毒σNs蛋白的抗体,腹水抗体效价达10^5以上,与其他参试非禽呼肠病毒毒株没有交叉反应,具有良好的特异性;病毒中和试验证明其没有中和能力,可以用于禽呼肠病毒的特异性检测。


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