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虹鳟I型干扰素基因的表达与纯化
作者: 张琳 [1] ; 丁雅苓 [2] ; 逯茂洋 [3] ; 夏春 [3] ; 张秀美 [1]
关键词: 虹鳟干扰素(rtIFN) 表达 发酵 纯化
摘要:为了获得能用于抗虹鳟(Rainbowtrout,学名,Oncorhynchusmykiss)病毒性疾病生物制剂开发的高纯度工型干扰素(rtIFN3)蛋白,克隆了虹鳟rtIFN3,构建了pET21a—rtIFN3/BL21(DE3)原核表达与发酵系,并对rtIFN3进行了表达。重组的rtlFN3分子质量约18.5ku,以包涵体形式表述,表达量占全菌蛋白量的16%。随后,提取2L发酵瓶的包涵体蛋白,经变性与复性后,再经分子筛和阴离子交换层析进行纯化。纯化后,rtlFN3SDS—PAGE电泳结果表明蛋白纯度达98%,复性率为3%。本研究获得的高纯度复性蛋白为生物制剂的研制提供了材料。
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