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猪繁殖与呼吸综合征病毒双重荧光RT—PCR检测方法的建立
作者: 张靖飞 [1] ; 张园 [2] ; 李志辉 [3] ; 王慧煜 [3] ; 曹达江 [4] ; 梅琳 [3]
关键词: ?猪繁殖与呼吸综合征病毒 高致病性毒株 双重荧光RT—PCR
摘要:为了建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒并且能够区分普通毒株和高致病性毒株的荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的国内发表的高致病性PRRSVNSP2基因序列,针对Nsp2缺失区设计一对引物和探针,在结合PRRSV通用检测引物探针进行荧光定量PCR,对反应条件进行优化,用已知PRRSV普通株和高致病性株及其他病毒进行试验。结果表明,该方法可以特异检测并区分高致病性株和普通株。将该方法用于临床标本的检测,通过对32份样本检测,通用阳性为28份,阳性率为87.5%。高致病性株为17份,阳性率为59.38%。表明建立的方法可以用于PRRSV的快速检测,并且可以区分普通株和高致病性株。