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猪繁殖与呼吸综合征病毒LAMP检测方法的建立与应用
作者: 郑新添 ; 黄翠琴 ; 黄其春 ; 杨小燕 ; 刘建奎
关键词: 环介导等温扩增 猪繁殖与呼吸综合征病毒 快速检测
摘要:为建立一种具有敏感性高、特异性强、方便、快速等特点的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的环介导等温扩增技术(LAMP),针对美洲型PRRSV的ORF5基因设计了一套LAMP引物,建立了LAMP反应体系,并对其敏感性、特异性等进行了评估。结果表明,该方法可在65℃、1h内完成最低限度5.49pg/μL含量的PRRSV核酸扩增,结果仅肉眼就能判定。该检测方法特异性强,与猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)等病原体无交叉反应;对25份临床样品检测表明,该方法的检出率高于常规RT-PCR法,且操作更为方便、快速。该检测方法特异、敏感、准确,可应用于临床检测PRRSV。