小反刍兽疫病毒Tibet 07株P蛋白的真核表达及鉴定

作者: 王清华 [1] ; 赵文年 [1,2] ; 刘春菊 [1] ; 王淑娟 [1] ; 包静月 [1] ; 王志亮 [1]

关键词: 小反刍兽疫 P蛋白杆状病毒表达系统

摘要：为应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的磷蛋白并对其进行鉴定,应用PCR技术扩增小反刍兽疫病毒Tibet 07株P基因片段,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBac-PPRV-P,进一步构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-P,转染sf 9细胞,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定P蛋白的表达,利用Western blot和间接免疫荧光鉴定P蛋白的抗原性。结果表明,表达的P蛋白分子质量约54ku;感染的sf 9细胞可与小反刍兽疫阳性血清发生特异性反应。表明应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的P蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

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小反刍兽疫病毒Tibet 07株P蛋白的真核表达及鉴定

作者: 王清华 [1] ; 赵文年 [1,2] ; 刘春菊 [1] ; 王淑娟 [1] ; 包静月 [1] ; 王志亮 [1]

关键词: 小反刍兽疫 P蛋白 杆状病毒表达系统

关键词: 小反刍兽疫 P蛋白杆状病毒表达系统