柯萨奇病毒 A 组16型衣壳蛋白 VP1的原核表达

作者: 王云龙 [1,3] ; 米海 [1] ; 李玉林 [2] ; 王继创 [1] ; 程蕾 [2] ; 邓黎黎 [2] ; 张春艳 [2] ; 孙园园 [2]

关键词: 柯萨奇病毒 VP1基因原核表达蛋白纯化

摘要：构建柯萨奇病毒A组16型（CVA16）衣壳蛋白VP1重组质粒pET-41a（＋）／VP1，优化诱导表达条件，进行原核表达及蛋白纯化。通过PCR扩增获得VP1基因片段并转进大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）内进行表达。从时间、温度、诱导剂浓度三个方面优化表达条件，收集表达菌体，经镍柱和DEAE柱纯化后，用蛋白印迹检测免疫反应性。结果表明，目的蛋白为包涵体，分子质量约为61ku，与设计蛋白分子质量大小相符，以诱导5h、IPTG的浓度为0．20mmoL／L、温度为37℃时蛋白表达量最高。纯化后蛋白纯度达到94％，蛋白印迹检测具有免疫反应性。试验成功获取了柯萨奇病毒A组16型（CVA16）VP1蛋白，且该蛋白具有免疫反应性。

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柯萨奇病毒 A 组16型衣壳蛋白 VP1的原核表达

作者: 王云龙 [1,3] ; 米海 [1] ; 李玉林 [2] ; 王继创 [1] ; 程蕾 [2] ; 邓黎黎 [2] ; 张春艳 [2] ; 孙园园 [2]

关键词: 柯萨奇病毒 VP1基因 原核表达 蛋白纯化

关键词: 柯萨奇病毒 VP1基因原核表达蛋白纯化