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牛白介素10的克隆、测序及其在CHO细胞的表达
作者: 敖敦格日勒 [1] ; 温德宝 [2] ; 百溪英一 [3] ; 格日勒图 [1]
关键词: 牛白介素-10 克隆 测序 真核表达
摘要:用RT—PCR方法从健康牛外周血淋巴细胞中扩增出牛白介素10(bIL-10)基因并进行测序,发现其核苷酸序列全长为537bp,编码179氨基酸,具有很好的遗传保守性。将该基因克隆到表达载体pcD—NA3.1/V5-HisVectorsA中,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1/V5-HisA/IL-10,将该质粒转染到CHO细胞中,采用SDS—PAGE和Westernblot方法检测培养物上清和沉淀物中bIL-10的表达,结果表达的bIL-10大小约为20ku。本试验为blL-10生物学特性及其基因多态性的研究奠定了基础。
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