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pEGFP-N1-pAPN-SPC段基因真核表达载体的构建及其在 Vero细胞中表达
作者: 杨震 ; 左玉柱 ; 裴丽华 ; 范京惠
关键词: 猪氨基肽酶 真核表达 猪流行性腹泻病毒 Vero细胞系
摘要:为了构建能够表达猪pAPN—SPC段的真核细胞表达载体pEGFP—N1-pAPN—SPC,并在vero细胞中进行表达,本试验从猪肠道黏膜组织基因组中扩增出pAPN-SPC段基因,插到带有EGFP基N的真核细胞表达载体pEGFP—N1中,经BamH工及EcoR工酶切鉴定正确后转染Vero细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用RT—PCR和Westernblot检测pAPN—SPC段基因的表达情况。结果成功构建了真核表达载体pEGFP—N1-pAPN—SPC,且pAPN-SPC段在Vero细胞中得到了有效表达,为研究pAPN—SPC段蛋白对病毒增殖效果的影响奠定了基础。