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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

pEGFP-N1-pAPN-SPC段基因真核表达载体的构建及其在 Vero细胞中表达

作者: 杨震 ; 左玉柱 ; 裴丽华 ; 范京惠

关键词: 猪氨基肽酶 真核表达 猪流行性腹泻病毒 Vero细胞系

摘要:为了构建能够表达猪pAPN—SPC段的真核细胞表达载体pEGFP—N1-pAPN—SPC,并在vero细胞中进行表达,本试验从猪肠道黏膜组织基因组中扩增出pAPN-SPC段基因,插到带有EGFP基N的真核细胞表达载体pEGFP—N1中,经BamH工及EcoR工酶切鉴定正确后转染Vero细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用RT—PCR和Westernblot检测pAPN—SPC段基因的表达情况。结果成功构建了真核表达载体pEGFP—N1-pAPN—SPC,且pAPN-SPC段在Vero细胞中得到了有效表达,为研究pAPN—SPC段蛋白对病毒增殖效果的影响奠定了基础。


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