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RNA标准物病毒样颗粒表达系统的构建及其特性研究
作者: 温和心 [1,2] ; 龙英全 [1] ; 蒋荣华 [1] ; 盘宝进 [2]
关键词: RNA标准物 病毒样颗粒 表达系统 构建 特性
摘要:为了构建RNA病毒样颗粒(virus-like particles ,VLP)表达系统pET28a(+)-MS,将插入的外源基因诱导表达获得相应的RNA标准物质病毒样颗粒,将MS2噬菌体包膜蛋白和成熟蛋白基因插入表达质粒pET-28a(+),构建pET28a(+)-MS重组子,将带有包装位点序列的外源 RNA对应的 cDNA插入成熟蛋白基因的下游,经过诱导表达含外源 RNA病毒样颗粒。结果表明,pET28a(+)-MS能表达活性的包膜蛋白(49.8 ku)和成熟蛋白(14.4 ku),能将外源基因 RNA包装成病毒样颗粒,该 VLP长度约1500 bp, RT-PCR反应性优良,能耐受RNase的降解,在血清中37℃经1个月未有明显降解。
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