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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

猪瘟病毒荧光定量RT-PCR和RT-LAMP快速检测方法的建立

作者: 唐景峰 ; 周康平 ; 韩振伟 ; 王业富

关键词: 猪瘟病毒 荧光定量RT-PCR 环介导等温扩增技术

摘要:建立了应用TaqMan-LNA的荧光定量 RT-PCR和反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)技术检测猪瘟病毒(CSFV)的两种方法。根据对NCBI中CSFV E2基因序列进行分析,设计了CSFV E2基因的引物和探针,并以E2基因为模板构建了重组质粒。通过梯度稀释阳性标准品进行试验表明荧光定量 RT-PCR和RT-LAMP检测下限分别为102拷贝/μL和101拷贝/μL;特异性试验表明,两种方法对于其他5种病毒不能检出,具有良好的特异性。临床样本检测同样表明两种方法都具有良好的特异性和灵敏度。说明所建立的Taq Man-LNA荧光定量RT-PCR和RT-LAMP可应用于CSFV的检测。


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