口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建

作者: 窦小龙 [1,2] ; 任晓冰 [1,2] ; 魏婕 [2] ; 苗书魁 [2] ; 冉多良 [1] ; 马文戈 [2]

关键词: Asia1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌

摘要：为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列，全基因长990 bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体 p7257-P43连接，构建成表达质粒 p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌 WB800，经筛选、鉴定，获得表达 p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的 LB中培养后，菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot 结果显示，该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体，具有良好的反应原性。电镜观察显示，融合蛋白组装为直径约50 nm大小的病毒样颗粒（VLP）。

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口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建

作者: 窦小龙 [1,2] ; 任晓冰 [1,2] ; 魏婕 [2] ; 苗书魁 [2] ; 冉多良 [1] ; 马文戈 [2]

关键词: Asia1型口蹄疫病毒 病毒样颗粒 融合蛋白 枯草芽胞杆菌

关键词: Asia1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌