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H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立
作者: 徐守振 ; 尹燕博
关键词: H9亚型禽流感病毒 新城疫病毒 鸡传染性支气管炎病毒 多重聚合酶链反应
摘要:根据GenBank发表的H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))HA基因、新城疫病毒(NDV)F基因和传染性支气管炎病毒(IBV)N基因分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了同时检测AIv(H9)、NDV和IBV的多重PCR方法,对其特异性和敏感性进行检验,并在临床中进行了初步应用。结果表明,该多重PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可同时扩增出大小分别为380bp(AIV(H9))、529bp(NDV)和853bp(IBV)的特异片段,能分别检出1PgAIV(H9)、1PgNDV和10PgIBV的RNA模板,且对AIV(H9)、NDV和IBV混合感染的临床阳性病料的检测结果与单项PCR的检测结果一致。该多重PCR方法可为AIV(Hg)、NDV和IBV的临床检测和流行病学调查提供技术支撑。
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