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布鲁菌OMP28蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立
作者: 张小娟 [1,2] ; 贾广乐 [1] ; 廖娟红 [1] ; 梅琳 [1] ; 王慧煜 [1] ; 李桂兰 [2] ; 张映 [2] ; 韩雪清 [1]
关键词: 布鲁茵 重组蛋白Omp28 间接ELISA 试剂盒
摘要:对布鲁菌Omp28基因进行大肠埃希茵表达,用表达的布鲁茵重组蛋白Omp28作为抗原包被酶标板,建立检测布鲁茵抗体间接ELISA方法,进一步研发试剂盒,用该试剂盒和IDEXX抗体检测试剂盒同时对540份临床牛血清样品进行检测,评价二者的符合率。反应条件优化后,该试弃1盒的抗原包被浓度为1ug/mL,作用条件为37℃1h;封闭液为50g/L脱脂乳,作用时间为30min;血清稀释度为1:200,作用时间为30min;酶标二抗稀释度为1:3×10。,作用时间为30min;与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率达96.67%,证明该试剂盒可用于临床牛布鲁菌抗体的检测。
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