牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者: 季新成 [1] ; 段琛 [2] ; 王克栋 [3] ; 史茜 [1] ; 于学辉 [1] ; 冉多良 [3]

关键词: 牛病毒性腹泻病毒内标双重反转录-聚合酶链反应共扩增

摘要：为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测，针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒（BVDV）基因组高度保守的5，_UTR核苷酸序列设计特异性引物（扩增长度为288bp）。为了指示假阴性结果，以牛GAPDH基因为内标基因，设计特异性引物（扩增序列长度为152bp）。通过反应条件的优化，建立了BVDV通用型内标双重RT—PCR检测方法，该方法可以监测RNA提取与RT—PCR反应过程，指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50／mL，且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验，检测到阳性样品19份，阳性率3．36％。该方法可用于临床样品中BVDV检测，并可对检测结果进行质量控制。

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牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者: 季新成 [1] ; 段琛 [2] ; 王克栋 [3] ; 史茜 [1] ; 于学辉 [1] ; 冉多良 [3]

关键词: 牛病毒性腹泻病毒 内标 双重反转录-聚合酶链反应 共扩增

关键词: 牛病毒性腹泻病毒内标双重反转录-聚合酶链反应共扩增