禽流感病毒H5、H7和H9亚型一步法多重RT-PCR检测方法的建立

作者: 屈素洁 ; 莫胜兰 ; 邹联斌 ; 胡杰 ; 张步娴 ; 梁媛 ; 粟艳琼 ; 施开创 ; 李军

关键词: 禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 H9亚型一步法多重RT-PCR

摘要：为了建立能同时检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒（AIV）的方法,参考GenBank中H5、H7和H9亚型AIV的HA基因序列的保守区域,利用Primer 5.0软件设计3对分别针对AIV H5、H7和H9亚型的特异性引物,预期特异扩增H5AIV片段大小为380bp、H7AIV为501bp、H9AIV为732bp。经过反应条件的优化,建立了同时检测H5、H7和H9亚型AIV的一步法多重RT-PCR方法。该方法特异性强,对其他亚型AIV和禽呼吸道病原体检测结果为阴性;敏感性高,H5、H7和H9亚型AIV RNA的最低检出量分别为10^-4、10^-4、10^-2拷贝/μL。初步建立了快速、敏感、特异地鉴别检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的分子生物学诊断方法。

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禽流感病毒H5、H7和H9亚型一步法多重RT-PCR检测方法的建立

作者: 屈素洁 ; 莫胜兰 ; 邹联斌 ; 胡杰 ; 张步娴 ; 梁媛 ; 粟艳琼 ; 施开创 ; 李军

关键词: 禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 H9亚型 一步法多重RT-PCR

关键词: 禽流感病毒 H5亚型 H7亚型 H9亚型一步法多重RT-PCR