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布鲁菌外膜蛋白Omp22基因的原核表达与生物信息学分析
作者: 朱华培 ; 赵天靖 ; 徐开莲 ; 贾晓晓 ; 郭莳雨 ; 史巧芸 ; 庞峰 ; 荣辉 ; 张珈宁 ; 成鹰 ; 焦寒伟 ; 杜丽 ; 王凤阳
关键词: 布鲁菌 外膜蛋白22基因 克隆 原核表达 生物信息学分析
摘要:克隆布鲁菌Omp22基因,原核表达后进行生物学信息分析。根据GenBank中羊种布鲁菌M5-90株基因组PCR扩增出639bp的目的基因片段,构建克隆重组质粒pMD-20T-Omp22,转化入E.coli DH5α。测序正确后构建表达重组质粒pET-28a-Omp22,转化入E.coli BL21(DE3)。IPTG诱导表达,Western blot鉴定诱导融合蛋白。结果表明,成功克隆Omp22基因,构建pET-28a-Omp22原核表达载体,在E.coli BL21(DE3)中表达Omp22基因。DNA Man和BIOEDIT软件生物性息学分析Omp22融合蛋白二级结构中α-螺旋占22.17%;伸展链占19.81%;β-折叠占2.83%;无规卷曲占55.19%。说明该蛋白具有较高亲水性。
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