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金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrD的原核表达及抗体制备
作者: 杜欣军 ; 王学连 ; 李萍 ; 耿洁洁 ; 张洪娟 ; 王硕
关键词: 金黄色葡萄球菌 表面蛋白 SdrD基因 重组表达 抗体制备
摘要：根据金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrD基因序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌标准菌株基因组为模板进行PCR扩增,获得了大小为2 043bp的基因片段。将基因片段连接至表达载体pET26b,转入大肠埃希菌BL21（DE3）中用IPTG诱导表达。SDS-PAGE结果表明,SdrD基因获得了较好的表达,重组蛋白的分子质量约为99ku。利用免疫亲和层析对目标蛋白进行纯化,获得了纯度较高的目标蛋白。用该蛋白免疫新西兰白兔制备了多克隆抗体,抗体效价达到1∶23 000,为金黄色葡萄球菌基因工程疫苗的开发与性能评价,以及该致病菌免疫检测技术的开发奠定了基础。