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绵羊痘病毒、山羊痘病毒及羊口疮病毒多重PCR检测方法的建立和应用
作者: 何亚鹏 张琪 史怀平 付明哲 许信刚 西北农林科技大学动物医学院 陕西杨凌712100 西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100
关键词: 多重PCR 绵羊痘病毒 山羊痘病毒 羊口疮病毒 检测
摘要：为了建立鉴别绵羊痘病毒（SPPV）、山羊痘病毒（GTPV）和羊口疮病毒（ORFV）的多重PCR检测方法,针对GenBank中3种病毒的基因组序列,合成了3对引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了鉴别检测3种病毒的多重PCR方法。特异性试验表明,应用该方法可分别扩增出3种病毒对应的目的片段,对大肠埃希菌、沙门菌、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、Vero细胞、正常羊组织的DNA和灭菌双蒸水均无扩增;敏感性试验表明,该方法最低检测量分别为30.46pg/μL的绵羊痘病毒、28.9pg/μL的山羊痘病毒和26.94pg/μL的羊口疮病毒基因组DNA;应用本方法对85份临床病料进行检测,结果与其他已建立的单项PCR检测方法结果一致,说明该方法可以用于临床上SPPV、GTPV和ORFV的鉴别诊断。
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