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猪圆环病毒2型诱导3D4/2细胞氧化应激模型的建立
作者: 尹丹 谭红连 郝祝兵 杨剑 韦英益 曾芸 李亮 廖玲玲 胡庭俊 广西大学动物科学技术学院 广西南宁530005 广西壮族自治区畜牧研究所 广西南宁530001 广西柯新源原种猪有限责任公司 广西南宁530001
关键词: 猪圆环病毒2型 猪肺泡巨噬细胞 氧化应激
摘要:通过研究不同浓度猪圆环病毒2型(PCV2)对体外感染3D4/2细胞产生氧化应激水平的影响,来确定建立PCV2体外诱导3D4/2细胞氧化胁迫模型的条件。以5个不同浓度PCV2感染组(100、10^-1、10^-2、10^-3、10^-4)作用于3D4/2细胞2h,弃去病毒液,加入含100mL/L胎牛血清1640培养液后继续培养,于4、8、12、24、48h分别收集细胞上清液或细胞,测定NO、ROS、GSH、GSSG、XOD、MPO和iNOS等指标。10^-1PCV2感染3D4/2细胞24h、48h后显著升高细胞NO水平,感染4h-24h显著升高细胞ROS水平,降低细胞GSH水平和GSH/GSSG比值;10^-1 PCV2感染3D4/2细胞4h、8h显著升高细胞GSSG水平;10^-1PCV2感染3D4/2细胞4、8、12、24h均能显著升高细胞XOD、MPO、iNOS活力,提示10^-1PCV2感染3D4/2细胞一定程度上改变了细胞氧化还原状态,诱导了细胞产生氧化应激,而病毒感染后48h未检测到PCV2核酸。表明PCV2感染后4h-24h能诱发3D4/2细胞氧化应激,选择10^-1PCV2作为氧化应激模型的感染剂量。
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