猪脑心肌炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

摘要：以猪脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditisvirus，EMCV）VPl重组蛋白为包被抗原，建立了检测EMCV血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）。经优化，获得间接ELISA的最佳反应条件为抗原包被浓度0．625／μg／mL，待检血清稀释度为1：40，封闭液为50g／L脱脂乳，酶标兔抗猪抗体稀释度为1：6000，底物显色时间为室温避光15min，血清样本阴阳性临界值为OD450nm值≥0．33。与口蹄疫病毒（Footandmouthdiseasevirus，FMDV）、猪瘟病毒（Classicalswinefevervirus，CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus，PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）、猪圆环病毒2型（Porcinecircovirustype2，PCV-2）抗体没有交叉反应。应用所建立的方法对广西2010年-2011年所采集的2228份血清进行检测，被检血清样品平均阳性率为91．47％，被检猪场阳性率为100％。表明广西地区猪群感染普遍。