小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达

作者: 龙云凤 [1] ; 祝贺 [2] ; 杨建明 [2] ; 陈朝银 [1] ; 徐维佳 [2] ; 周晓黎 [2] ; 董俊 [2] ; 叶玲玲 [2] ; 艾军 [2]

关键词: 小反刍兽疫病毒 N基因杆状病毒表达载体昆虫细胞表达

摘要：为了研发小反刍兽疫病毒ELISA检测试剂盒中替代全病毒的抗原物质，参照GenBank公布的小反刍兽疫疫苗株Nigeria75／1的全基因组序列（GenBank登录号：X74443），人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列，通过PCR扩增、经引物设计引入的EcoRI和KpnI特异性酶切位点，将N基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA，阳性重组质粒命名为pFastBacHTA-PPRV-N，测序结果显示N基因片段长度为1578bp。将该重组质粒转化合有杆状病毒穿梭载体的DHl0Bac感受态细胞，得到重组穿梭质粒Bacmid-PPRV-N，将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞Sf9，获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Westernblot分析表明该蛋白得到表达产物，具有与抗体反应的活性，大小约为61．3ku。

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小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达

作者: 龙云凤 [1] ; 祝贺 [2] ; 杨建明 [2] ; 陈朝银 [1] ; 徐维佳 [2] ; 周晓黎 [2] ; 董俊 [2] ; 叶玲玲 [2] ; 艾军 [2]

关键词: 小反刍兽疫病毒 N基因 杆状病毒表达载体 昆虫细胞 表达

关键词: 小反刍兽疫病毒 N基因杆状病毒表达载体昆虫细胞表达