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猪附红细胞体SRP54基因的克隆及表达质粒的构建
作者: 邢莹 [1] ; 贾立军 [1] ; 张守发 [1]
关键词: 猪附红细胞体 信号识别颗粒 克隆 生物信息学分析 表达质粒
摘要:根据GenBank上发表的猪附红细胞体全基因组序列(登录号:NC_015153.1),针对其中的信号识别颗粒(SRP)基因设计合成一对特异性引物,应用PCR方法扩增猪附红细胞体信号识别颗粒54(SRP54)基因片段,克隆至pMD18-Tsimple载体上,经PCR、酶切初步鉴定正确后进行测序,对所克隆片段进行生物信息学分析,并构建重组表达质粒pGEX-SRP54。结果显示,克隆的SRP54基因片段大小为1164bp,与GenBank中参考序列的同源性为97%;该基因编码381个氨基酸,编码蛋白的等电点为6.51,无跨膜区;重组表达质粒pGEX-SRP54构建正确。
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