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鸡Mx基因的原核表达及表达蛋白抗病毒活性初步研究
作者: 陈胜锋 [1] ; 王丙云 [1] ; 高健潜 [1] ; 陈志胜 [1] ; 计慧琴 [1] ; 陈金顶 [2]
关键词: MX蛋白 原核表达 抗病毒活性 鸡
摘要：将鸡Mx基因克隆入pET-32a载体,筛选鉴定后将重组阳性质粒转化到大肠埃希菌株BL21进行诱导表达,表达产物用Western blot鉴定,并经镍亲和层析法纯化及透析复性,得到的蛋白用微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。结果显示,构建的载体经PCR扩增得到长度为2 118 bp的特异片段,测序结果证实与鸡Mx基因同源性99.95%,Western blot结果显示在78 ku处检测到特异性蛋白条带,微量细胞病变抑制试验结果显示,表达产物经8倍和256倍稀释后可分别保护50%鸡胚成纤维细胞免受新城疫病毒（NDV）和水疱性口炎病毒（VSV）的感染。结果表明,成功表达了鸡Mx蛋白,且表达产物具有一定的抗DNV和VSV活性。