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一株偶发分支杆菌基因组文库的构建
作者: 王铁峰 [1] ; 毛冉 [1] ; 赵雪峰 [2] ; 钱爱东 [1]
关键词: 非结核分支杆菌 偶发分支杆菌 基因组文库 真空冷冻干燥技术
摘要：对一株致病性的非结核分支杆菌（NTM）即偶发分支杆菌（M.fortuitum）建立基因组文库,选用同尾酶Sau3 AⅠ和BamHⅠ分别酶切基因组DNA和载体pUC18,回收1 kb~7 kb大小范围的插入性DNA片段,与已经酶切去磷酸化的载体用T4连接酶连接,并转化入DH5α感受态细胞中,进行蓝白斑和氨苄抗性筛选,用PCR方法检测连接效率。结果得到阳性克隆4×104个,达到基因组文库要求,用真空冷冻干燥技术保存。该文库的建立为以后对该菌特殊基因方面的研究及基因结构和调控等研究奠定了良好基础,同时也为其他NTM的研究工作奠定了一定的技术和理论基础。