角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析

作者: 吴刘成 [1] ; 刘春 [2] ; 蒋荧梅 [1] ; 王生存 [2] ; 邵义祥 [1,2]

关键词: B6-Co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增序列分析

摘要：对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。

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角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析

作者: 吴刘成 [1] ; 刘春 [2] ; 蒋荧梅 [1] ; 王生存 [2] ; 邵义祥 [1,2]

关键词: B6-Co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增 序列分析

关键词: B6-Co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增序列分析