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狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒中的表达及鉴定
作者: 郑光来 ; 卢晓冉 ; 张永武 ; 张静远 ; 陈腾 ; 王东方 ; 严妍 ; 张守锋 ; 扈荣良
关键词: 狂犬病病毒 杆状病毒表达系统 磷蛋白
摘要:采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒BD06株的磷蛋白(P)基因片段,将其插入杆状病毒穿梭载体pFastBac1获得的pFastBac1-P重组质粒,转化E.coli DH10Bac成功构建出杆状病毒表达质粒Bac-mid—P,用脂质体介导Bacmid—P转染Sf9细胞获得重组杆状病毒(AcMNPV-p)。经SDS—PAGE、Westernblot和直接免疫荧光分析鉴定,BD06-P蛋白在杆状病毒中成功表达,且具有良好的反应原性,为进一步研究狂犬病病毒磷蛋白的结构和功能奠定了基础。
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