鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备

作者: 戴银 [1] ; 王承志 [2] ; 刘生杰 [3] ; 沈学怀 [1] ; 赵瑞宏 [1] ; 胡晓苗 [1] ; 张丹俊 [1]

关键词: 鸡MHCI类分子原核表达多克隆抗体

摘要：为制备MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料，构建了鸡MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达，进而制备鸡MHCβ分子的多克隆抗体。应用PCR方法，克隆鸡MHCⅠα和β2m基因，构建重组载体pET—MHCⅠα和pET—MHCⅠβ2m，经PCR、双酶切和测序鉴定后，将重组质粒在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达，融合蛋白纯化后，接种昆明小鼠制备多克隆抗体，血清稀释后用免疫印迹法（Western blot）分析。结果表明，鸡MHCⅠα和β2m基因在大肠埃希菌中成功表达，融合蛋白分子质量分别约为52．1ku和33．0ku；制备的鼠抗鸡MHCⅠα和β2m链多克隆抗体，经Western blot检测证实抗体特异性较强，可进一步用于鸡MHC工分子的研究。

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鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备

作者: 戴银 [1] ; 王承志 [2] ; 刘生杰 [3] ; 沈学怀 [1] ; 赵瑞宏 [1] ; 胡晓苗 [1] ; 张丹俊 [1]

关键词: 鸡MHCI类分子 原核表达 多克隆抗体

关键词: 鸡MHCI类分子原核表达多克隆抗体