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小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较
作者: 刘玉辉 [1] ; 赖金伦 [1] ; 寇明明 [1] ; 邓明亮 [1] ; 刘瑞宁 [1] ; 陈颖钰 [1,2] ; 胡长敏 [1,2] ; 郭爱珍 [1,2]
关键词: 小鼠乳腺上皮细胞 奶牛乳腺上皮细胞 分离 培养 生长特性
摘要：为建立小鼠乳腺上皮细胞（MMECs）及奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）分离培养体系,并比较其生长特性。分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18的免疫荧光鉴定;通过细胞形态跟踪观察评价传代、冻存和复苏后MMECs及BMECs生物学特性;连续培养及细胞计数绘制MMECs及BMECs生长曲线。结果显示,从小鼠和奶牛乳腺组织分离的目的细胞,经角蛋白18免疫荧光鉴定证实为MMECs及BMECs;汇合的单层MMECs多角形,呈铺路石样外观,BMECs呈鹅卵石样;MMECs在传至第2代时细胞特有形状消失,而BMECs传至第9代时仍保持其鹅卵石样外观;MMECs只能复苏冻存原代细胞,传代BMECs均可冻存和复苏。采用改良混合酶消化结合差速贴壁法可获得高纯度的MMECs和BMECs,两种细胞在生长培养特性上存在显著差异。
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