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膜连蛋白 A2基因实时荧光定量 PCR 检测方法的建立及应用
作者: 张海霞 [1] ; 马玉梅 [3] ; 包晓婧 [3] ; 徐雷 [3] ; 李向茸 [1] ; 谢晶莹 [3] ; 马忠仁 [1,2] ; 冯若飞 [1,2]
关键词: 膜连蛋白A2 SYBR Green工实时荧光定量聚合酶链反应 检测
摘要：为建立膜连蛋白 A2（AnxA2）基因 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法，根据 Gen-Bank 中公布的 AnxA2基因序列设计并合成引物，经过条件优化，建立了 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 检测方法。该方法线性关系较好，以质粒标准品构建的标准曲线相关系数 R2为0．999；灵敏性好，比普通 PCR 灵敏100倍。应用建立的方法对随机选取的几种哺乳动物细胞进行检测。结果表明，建立的方法能成功检出不同细胞中 AnxA2含量。表明本研究建立的 AnxA2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR 检测方法灵敏性高，重复性好，可用于 AnxA2的检测及定量分析。