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H3N2亚型禽流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
作者: 刘婷婷 [1] ; 谢芝勋 [2] ; 宋德贵 [1] ; 谢志勤 [2] ; 邓显文 [2] ; 谢丽基 [2] ; 黄莉 [2] ; 罗思思 [2] ; 黄娇玲 [2] ; 曾婷婷 [2]
关键词: 禽流感病毒 H3N2亚型 实时荧光定量RT-PCR
摘要：为建立快速、简便检测H3N2亚型禽流感病毒（AIV）的方法,根据H3和N2亚型AIV HA、NA基因保守序列,分别设计筛选了特异性引物和用不同荧光基团标记的TaqMan探针。通过优化反应条件,建立了H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示该法特异性强,不与其他亚型AIV和常见禽病病原体发生交叉反应,敏感性达100拷贝/μL;组内组间重复性好,平均变异系数均小于3%;应用该法对96份临床样品检测,结果与病毒分离鉴定结果一致。表明本研究建立的H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于H3N2亚型AIV的快速诊断和监测。