多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

作者: 温青娜 [1] ; 周玲玲 [2] ; 申红 [3] ; 杨菊凤 [4] ; 林祥群 [5]

关键词: 欧洲型美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒多重实时荧光定量PCR

摘要：根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。

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多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

作者: 温青娜 [1] ; 周玲玲 [2] ; 申红 [3] ; 杨菊凤 [4] ; 林祥群 [5]

关键词: 欧洲型 美洲型 高致病性 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重实时荧光定量PCR

关键词: 欧洲型美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒多重实时荧光定量PCR