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小反刍兽疫病毒与产气荚膜梭菌双重RT-PCR检测方法的建立
作者: 唐娜 [2] ; 孙翠平 [2] ; 王玉茂 [1] ; 刘吉山 [1] ; 张倩 [2] ; 贾锐 [2] ; 谢金文 [1] ; 李书光 [1] ; 苗立中 [1] ; 沈志强 [1,2]
关键词: 羊 小反刍兽疫病毒 产气荚膜梭菌 双重PCR 鉴别诊断
摘要:为实现小反刍兽疫病毒与产气荚膜梭菌的鉴别诊断,采用改良RNA/DNA提取试剂提取动物组织中的细菌DNA和病毒RNA,基于2014年流行的小反刍兽疫病毒N蛋白基因和产气荚膜梭菌α毒素编码基因序列分别设计合成特异性引物,建立双重PCR方法,优化反应条件,并分析方法的灵敏度与特异性。结果表明,所建立的双重PCR检测方法可以同步检测PPRV和产气荚膜梭菌,分别扩增出406bp和272bp大小特异性条带,方法特异性好,检测灵敏度能够分别达到0.001TCID50/mL和10个CFU/mL。
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