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泰勒虫重组抗原Tams1-spag基因原核表达与纯化
作者: 任方 [1,3] ; 易忠 [1] ; 米晓云 [1] ; 魏婕 [1] ; 马文戈 [1] ; 郭会玲 [1] ; 苗书魁 [1] ; 汪丽群 [2] ; 王延 [1] ; 薛英 [1] ; 黄炯 [1] ; 魏玉荣 [1]
关键词: 环形泰勒虫 重组蛋白 原核表达 蛋白纯化
摘要：为了在低成本的情况下,得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白,设定表达过程中不同的OD600nm、IPTG浓度与诱导时间,探索最佳表达条件。通过KCl染色法切胶后分别经透析袋电洗脱法与快速离心法回收目的蛋白。对上述试验的蛋白样品进行SDS-PAGE和Western blot检测。结果表明,在OD600nm=1时加入浓度为1mmol/L IPTG,过夜诱导时,重组蛋白的表达量最大。在KCl染色法切胶回收目的条带的基础上,电洗脱法与快速离心法均能得到同等浓度的高纯度目的蛋白,经Western blot检测重组蛋白的生物活性没有改变,仍具有良好的反应原性。