鸭坦布苏病毒包膜蛋白的原核表达和间接ELISA抗体检测方法的建立

作者: 郝明飞 [1] ; 张琳 [2] ; 胡北侠 [2] ; 崔言顺 [1] ; 张秀美 [2]

关键词: 鸭坦布苏病毒包膜蛋白原核表达间接酶联免疫吸附试验

摘要：为建立特异性和敏感性高的检测鸭坦布苏病毒感染的方法，采用原核表达系统对鸭坦布苏病毒（DTMUV）E基因进行了克隆与表达，SDS—PAGE电泳结果显示融合蛋白大小为54．3ku。Westernblot结果表明，经亲和层析法纯化后的重组蛋白能与DTMuV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组E蛋白作为包被抗原，初步建立了检测E蛋白抗体的间接ELISA方法。对ELISA各种反应条件进行了优化，确定了最适工作条件。优化后确定的抗原最适包被浓度为7μg／mL，血清的最佳稀释度为1：320，酶标抗体最适稀释度为1：1000。在优化条件下，阴性和阳性临界值判定标准为0．3244。本研究建立的快速检测DT—MuV抗体的间接ELISA方法为该病的检测和流行病学调查提供了技术手段。

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鸭坦布苏病毒包膜蛋白的原核表达和间接ELISA抗体检测方法的建立

作者: 郝明飞 [1] ; 张琳 [2] ; 胡北侠 [2] ; 崔言顺 [1] ; 张秀美 [2]

关键词: 鸭坦布苏病毒 包膜蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验

关键词: 鸭坦布苏病毒包膜蛋白原核表达间接酶联免疫吸附试验