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鹅细小病毒YBLJ株VP3基因的真核表达
作者: 张颖 ; 鲁承 ; 赵文婧 ; 陈海迪 ; 高旭
关键词: 鹅细小病毒 VP3基因 真核表达
摘要:为了研究鹩细小病毒(GPV)YBLJ株VP3基因的生物学特性,根据已克隆的GPVYBLJ株VP3基因序列(GenBank:JN836326),设计并合成一对特异性引物,经PCR扩增、克隆、转化、酶切与亚克隆,构建真核表达载体pcDNA-VP3,将鉴定正确的质粒转染至Vero细胞,经RT—PCR检测VP3基因转录水平,通过间接免疫荧光试验(IFA)观察VP3基因表达水平。结果显示,克隆的VP3基因全长约1605bp,构建了真核表达载体pcDNA—VP3,经RT—PCR对转染细胞总RNA扩增得到特异性目的片段,IFA检测显示VP3基因在Vero细胞中获得了稳定表达。本研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础。
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